中国计量院标准物质最新国际比对与互认结果（系列四）

时间： 2023-04-13 - 09:21 周四

必威中文官网（以下简称“中国计量院”）作为国家最高计量科学研究中心和国际计量互认（CIPM MRA）签约方，担负着确保国家量值统一和国际一致、保持国家最高测量能力等重要而光荣的使命。开展计量互认的核心技术手段是国际计量比对和质量管理体系国际同行评审，具体成果形式是公布在国际计量局（BIPM）网站上的国家校准测量能力（CMC）。标准物质和能力验证样品赋值是各国计量院开展化学、生物等领域CMC能力对外传递，支撑全球检测结果互认的重要方式。

在过去一年中，中国计量院主导或参加完成了CCQM、APMP、ACRM、ASTM等组织的标准物质相关国际比对近30项，与标准物质紧密相关的化学、生物领域CMC互认数量累计达1061项。新取得的标准物质相关国际互认能力聚焦食品安全、环境保护、生命科学等热点、前沿领域，进一步证明了中国计量院标准物质先进的定值测量能力，为相关标准物质的应用与推广奠定了良好基础。

1.新冠等病毒检测

中国计量院研发的核酸、抗原和抗体系列的病毒检测用标准物质，在各类病毒疾病防控与诊断试剂研发中已得到广泛应用。尤其是新型冠状病毒检测相关标准物质，在过去的三年中，广泛应用于全国31个省市的近千家单位，为保障新型冠状病毒检测结果准确、可比、可溯源提供了计量技术支撑。

在新型冠状病毒核酸检测方面，中国计量院成功主导了CCQM P199B新型冠状病毒核酸测量国际比对，比对结果表明NIM在RNA拷贝数定量方面的测量能力获得了国际等效（结果待正式公开）。这支撑了GBW(E)091089-091090 新型冠状病毒核酸标准物质、GBW09298-09299新型冠状病毒（2019-nCoV）体外转录RNA标准物质、GBW09300新型冠状病毒（2019-nCoV）全序列假病毒RNA标准物质、GBW09310-09314新型冠状病毒（2019-nCoV）核衣壳蛋白和包膜蛋白亚基因组RNA标准物质、GBW09315新型冠状病毒（2019-nCoV）贝塔B.1.351变异株基因组RNA标准物质、GBW09316新型冠状病毒（2019-nCoV）德尔塔B.1.617变异株基因组RNA标准物质、GBW09317新型冠状病毒（2019-nCoV）伽马P.1变异株基因组RNA标准物质、GBW09318新型冠状病毒（2019-nCoV）奥密克戎BA.1.1变异株基因组RNA标准物质量值的准确可靠。

在新型冠状病毒抗体检测方面，中国计量院与国际计量局BIPM、加拿大NRC联合主导了新冠单抗比对 CCQM-P216。所建立的单克隆抗体表征和测量方法以及新型冠状病毒抗体标准物质，为此次主导该项比对提供了有力支撑。目前，两轮比对已经完成，比对结果进一步证明了中国计量院标准物质先进定值测量能力，快速提升了世界各国在单抗蛋白类结构复杂生物大分子的测量能力，为提升新型冠状病毒抗体测量的准确性提供了技术支撑。关联的标准物质包括GBW(E)091109 新型冠状病毒刺突糖蛋白（S蛋白）人源IgG单克隆抗体溶液标准物质和GBW(E)091110 新型冠状病毒核衣壳蛋白（N蛋白）人源IgG单克隆抗体溶液标准物质。

图1 CCQM P216新冠单抗测量比对结果

在HIV检测方面，2019 ~ 2022年，中国计量院参加了国际比对CCQM P199 HIV-1 RNA 拷贝数定量测量，采用数字PCR方法对不同浓度水平HIV-1 RNA分子进行拷贝数定量测量。比对结果证明，中国计量院HIV-1 RNA 拷贝数定量测量能力获得国际等效，支撑了NIM-RM 5212人类免疫缺陷病毒Ⅰ型gag基因RNA标准物质的准确定值。

图2 CCQM P199 HIV-1 RNA 拷贝数定量测量比对结果

2.肿瘤标志基因检测

基因检测是为癌症患者选择靶向治疗药物时所需的重要检测项目。HER2基因检测主要针对乳腺癌患者；EGFR基因检测则面向肺癌患者；BRAF（B-Raf proto-oncogene, serine/threonine kinase）基因是人类最重要的原癌基因之一，大约8%的人类肿瘤发生BRAF突变。BRAF绝大部分突变形式为BRAF V600E突变，主要发生于黑色素瘤、结肠癌和甲状腺癌中；PIK3CA突变作为最常见的致癌突变类型之一，在包括小细胞肺癌、三阴性乳腺癌等在内的难治肿瘤中发生率尤其高；而KRAS基因也是公认的癌基因，KRAS突变型患者不能从抗EGFR治疗中获益，反而徒增不良反应危险和治疗费用。《美国国立癌症综合网络（NCCN）结直肠癌临床实践指南》指出，所有转移性结直肠癌患者都应检测KRAS基因状态。

中国计量院主导了CCQM K176乳腺癌HER2拷贝数变异测量关键比对，比对结果表明，中国计量院在HER2和内参基因拷贝数绝对定量和比值测量两个方面都达到了国际等效，验证了GBW09116-GBW09120 HER2基因组DNA标准物质的定值能力。

CCQM P184 肿瘤标志基因突变测量是中国计量院参与的另一国际计量比对。比对结果表明，中国计量院在测量单核苷酸变异和对应野生型拷贝数浓度以及比值方面均获得了国际等效。通过比对，GBW09855 BRAF（V600E）基因突变基因组DNA标准物质、NIM-RM4046 BRAF（V600E）基因突变循环肿瘤DNA标准物质、NIM-RM4044 EGFR（L858R）基因突变循环肿瘤DNA标准物质、NIM-RM4045 EGFR（19Del）基因突变循环肿瘤DNA标准物质、NIM-RM5226 EGFR（19Del）基因突变基因组DNA标准物质、NIM-RM5227 EGFR（T790M、L858R）基因突变基因组DNA标准物质、NIM-RM5228 PIK3CA（E542K）基因突变、NIM-RM5229 PIK3CA（E545K）基因突变基因组DNA标准物质、NIM-RM5230 PIK3CA（H1047R）基因突变基因组DNA标准物质的定值测量能力得到了验证。

CCQM P184肿瘤标志基因突变测量国际比对结果（5a为NIM结果）如图3 ~图4所示。

图3 BRAF V600E变异型基因拷贝数浓度比对结果

图4 BRAF野生型基因拷贝数浓度比对结果

此外，中国计量院还主导了中、日、韩三国的ACRM KRAS基因变异测量国际比对。比对结果表明NIM在KRAS基因变异拷贝数定量、野生型拷贝数定量和变异比例测量方面均获得国际等效，可以实现相关标准物质的准确定值。相关标准物质包括：GBW09841 KRAS（G12A）基因突变丰度标准物质、GBW09842 KRAS（G12D）基因突变丰度标准物质、GBW 09843 KRAS（G12R）基因突变丰度标准物质、GBW09844 KRAS（G12C）基因突变丰度标准物质、GBW09845 KRAS（G12S）基因突变丰度标准物质、GBW09846 KRAS（G12V）基因突变丰度标准物质、GBW09847 KRAS（G13D）基因突变丰度标准物质、GBW09848 KRAS基因7种突变丰度标准物质（1%水平）和GBW09849 KRAS基因7种突变丰度标准物质（5%水平）。

ACRM KRAS基因突变测量国际比对结果如图5 ~ 图8所示。

图5 KRAS（G12V）变异型基因拷贝数比对结果

图6 KRAS野生型基因拷贝数比对结果

图7 KRAS（G12V）变异型基因丰度比对结果

图8 单拷贝基因数比对结果

3.临床诊断标志物

糖化血红蛋白是血液中葡萄糖与红细胞血红蛋白相结合的产物。血红蛋白糖化是一个缓慢的、不可逆的非酶促反应，与血糖浓度和高糖存在时间相关。糖化血红蛋白可反映过去2~3个月的平均血糖浓度，其不受每天血糖波动的影响，在高血糖和血糖波动较大时，具有很高的诊断意义。

2021 ~ 2022年中国计量院作为联合主导单位，与新加坡计量院HSA、法国计量院LNE和韩国计量院KRISS共同主导了CCQM P219糖化血红蛋白的国际比对，采用同位素稀释质谱对RELA2022样品进行了测定。比对结果显示中国计量院建立的糖化血红蛋白同位素稀释质谱法结果和IFCC液相色谱-串联质谱参考方法结果一致，且处于国际比对结果的等效区间，证明了中国计量院糖化血红蛋白的校准测量能力，保证了中国计量院NIM-RM 3625和NIM-RM 3626糖化血红蛋白标准物质量值的准确与国际等效性。